rhIL-7, интерлейкин 7 человека, рекомбинантный белок

rhIL-7, интерлейкин 7 человека, рекомбинантный белок
rhIL-7, интерлейкин 7 человека, рекомбинантный белок
Объем: 0 мкг
Наличие: Есть в наличии
Цена: 0 р.

Доступные варианты

* Фасовка:
Количество:  

Синонимы:   Interleukin 7, IL-7

Источник:    Клеточная линия CHO, продуцирующая rhIL-7.

Чистота:   >98% в соответствии с электрофорезом в ПААГ с последующим окрашиванием Coomassie Brilliant Blue.

Уровень эндотоксина:   <0.1 EU на 1 мкг белка, LAL-тест.

Предсказанный молекулярный вес:  25 кДа в редуцирующих условиях в ПААГ.

Биологическая активность: Оценивалась по пролиферации ФГА-активированных мононуклеарных клеток периферической крови человека. ED50: 0,07 - 0,5 нг/мл. Оптимальная концентрация для индивидуального применения определятся пользователем.

Форма

Лиофильно высушен из фосфатного буферного раствора (PBS), содержащего 0,05% Tween20, pH 7.0, профильтрованного через фильтр с диаметром пор 0,22мкм.
Не содержит вспомогательных белков.

Разведение

Центрифугировать флакон при 1000rpm, 3 мин. Добавить стерильный фосфатный буферный раствор (PBS) до конечной концентрации 0,1-1 мкг/мкл. Оставить на 20-30 мин при комнатной температуре, затем центрифугировать при 1000rpm в течение 1 мин, и мягко ресуспендировать. Для приготовления рабочих растворов можно использовать буфер на водной основе или культуральную среду.

Добавление вспомогательных белков (BSA или FBS) не является необходимым.

Условия транспортировки

Перевозить при температуре окружающей среды.

Стабильность и Условия хранения

  • 12 месяцев, хранение невскрытой упаковки, при температуре от -20 до -70°C.
  • 1 месяц, разведенный в стерильных условиях, при температуре от 2 до 8°C.
  • 6 месяцев, разведенный в стерильных условиях, при температуре от -20 до -70°C.

Не рекомендуются повторные циклы замораживания-оттаивания раствора рекомбинантного белка.

Описание
Дополнительное описание

Интерлейкин 7 человека ИЛ-7 (англ. Interleukin-7, IL-7).

IL-7 – гемопоэтический ростовой фактор, который стимулирует дифференцировку T-лимфоцитов и поддерживает гомеостаз наивных T-клеток и T-клеток памяти. Возможно, IL-7 человека участвует в регуляции постнатального развития B-лимфоцитов. IL-7 играет важную роль в развитии вторичных лимфоидных органов.
 
Гомология с IL-7 крысы Rattus norvegicus составляет 62,1%; мыши Mus musculus – 61,5% (по результатам поиска гомологов программой blastp в базе UniProt).
IL-7 человека и мыши демонстрируют межвидовую кросс-реактивность (Barata et al., 2006).
 
Белок кодируется геном IL7. Цитогенетическая локализация гена: 8q21.13;
Геномные координаты: 78,675,869-78,806,829. 
 
IL-7 синтезируется в виде пропепида, сигнальная последовательность в котором занимает позиции 1—25. Каноническая последовательность зрелого белка состоит из 152 аминокислотных остатков. Пространственная структура IL-7 представляет собой связку из 4 α-спиралей «вверх-вверх-вниз-вниз» с двумя петлями. В структуре природного белка присутствуют 3 дисульфидные связи, три остатка аспарагина гликозилированы.
 
IL-7 экспрессируется в стромальных клетках костного мозга, лимфатических узлов, эпителиальных клетках кишечника и дыхательных путей, в железистых клетках аппендикса, в поперечно-полосатой мышечной ткани скелетных мышц и клеток сердца, в гладкомышечных клетках, клетках щитовидной и паращитовидных желёз, надпочечников и множеством клеток других типов. IL-7 также продуцируется клеточными линиями HMC-1, HEL, HDLM-2 (лимфоидные) и другими.
Эффекты IL-7 опосредованы его взаимодействием с рецептором – IL-7R. Он формируется двумя цепями: цепь α (IL-7Rα, IL-7R, CD127) и цепь γ (γc, CD132). Последняя является общим компонентом рецепторов к интерлейкинам 2, 4, 7, 9, 15, 21. Высокоаффинное лиганд-рецепторное взаимодействие обеспечивается присутствием обеих цепей, однако возможно низкоаффинное взаимодействие с компонентом CD127. При связывании с лигандом происходит гетеродимеризация цепей рецептора и активация киназ JAK1, ассоциированной с IL-7Rα, и JAK3, ассоциированной с γc. Фосфорилирование субъединиц рецептора этими киназами ведёт к привлечению белков STAT5A и STAT5B и, в меньшей степени, STAT1 и STAT3. Затем белки STAT димеризуются, транслоцируются в ядро и стимулируют экспрессию ряда генов, контролирующих выживание клеток и пролиферацию: BCL-XL, c-myc, циклины типа D. Возможно, IL-7 также запускает сигнальный каскад PI3K/AKT, что ведёт к экспрессии генов белков-транспортёров GLUT-1 и трансферрина, а также ингибированию апоптотических белков и белка p27, являющегося ингибитором клеточного цикла. Связывание IL-7 с рецептором также приводит к стабильной экспрессии гена белка Cdc25A, что способствует пролиферации T-лимфоцитов (Kittipatarin, Khaled, 2007). 
IL-7 человека играет важную роль в развитии и гомеостазе T-лимфоцитов. Мутации в генах IL-7Rα, γc,, JAK3 приводят к снижению количества T-лимфоцитов и развитию синдрома тяжёлого комбинированного иммунодефицита (ТКИН), при этом количество B-лимфоцитов и натуральных (естественных) киллеров остаётся нормальным (Lundström, Fewkes, Mackall, 2012). У мышей IL-7необходим для развития и T-, и B-клеток. Исследования in vitro показали, что у человека IL-7 может участвовать в постнатальном развитии B-клеток (Ceredig, Rolink, 2012).
 
IL-7R экспрессируется в лимфоидных клетках врождённого иммунитета (ILC), а именно в клетках-индукторах лимфоидной ткани (LTi, RORγt+ ILC) и в натуральных хелперах (NH, нуоциты), но не в натуральных (естественных)  киллерах (NK). Наиболее хорошо изучены эффекты IL-7 на LTi-клетки. IL-7 стимулирует появление LTα1β2 на поверхности LTi-клеток, что необходимо для развития и нормального формирования вторичных лимфоидных органов.  IL-7-сигналинг строго необходим для развития Пейеровых бляшек, но не лимфатических узлов. Он также необходим для нормального постнатального развития лимфоидной ткани кишечника. IL-7 участвует в развитии клеток с фенотипом NKR+RORγt+, не относящиеся к NK-линии и не являющиеся незрелой формой NK-клеток. IL-7 стабилизирует экспрессию RORγt ILC-клетками. Микробиота кишечника способствует продукции IL-7 клетками эпителия кишечника (Vonarbourg, Diefenbach, 2012). 
Повышенный уровень IL-7 наблюдается при лимфопении. Несколько вариантов однонуклеотидного полиморфизма гена IL7R ассоциированы с аутоиммунными заболеваниями: рассеянный склероз, диабет I типа, первичный билиарный холангит, язвенный колит, саркоидоз. Мутации в генах, контролирующих IL-7-сигналинг, встречаются при T- и B-клеточном остром лимфобластном лейкозе (Lundström, Fewkes, Mackall, 2012).
 
IL-7 – перспективное терапевтическое средство. Введение препарата рекомбинантного человеческого IL-7 в организм человека приводит к повышению количества циркулирующих T-лимфоцитов  пропорционально дозе препарата. Особенно значительно повышается количество недавних эмигрантов из тимуса, наивных T-клеток и центральных T-клеток памяти. Количество клеток T-reg (CD4+FOXP3+) не изменяется, но их относительное количество снижается. Введение рекомбинантного IL-7 влияет на клеточный цикл T-лимфоцитов: количество делящихся клеток возрастает с 5% до 50% от всего пула T-клеток. Время полужизни рекомбинантного IL-7 в организме человека составляет 7—23 часов, некоторые фармакодинамические эффекты проявляются после клиренса препарата (Lundström, Fewkes, Mackall, 2012).
Перспективной областью применения IL-7 является разработка и получение биомедицинских клеточных продуктов на основе генетически модифицированных лимфоцитов, несущих химерный рецептор к опухолевым антигенам (CAR-T cells). В таком случае IL-7 (вместе с IL-2 и IL-15) используется для экспансии культур трансдуцированных вирустными векторами Т-лимфоцитов. 
 

Использованная литература

Barata et al. // Exp Hematol (2006), 34(9): 1133
Ceredig R., Rolink A.G. // Semin Immunol (2012), 24(3): 159
Kittipatarin C., Khared A.R. // Cytokine (2007), 39(1): 75
Lundström W., Fewkes N.M., Mackall C.L. // Semin Immunol (2012), 24(3): 218
McElroy C.A., Dohm J.A., Walsh S.T.R. // Structure (2009), 17(1): 54 (https://www.rcsb.org/structure/3DI3) 
Vonarbourg C., Diefenbach A. // Semin Immunol (2012), 24(3): 165
https://www.proteinatlas.org/ENSG00000104432-IL7/tissue
https://www.uniprot.org/uniprot/P13232
https://omim.org/entry/146660?search=IL7&highlight=il7