rhIL-15, интерлейкин 15 человека, рекомбинантный белок

rhIL-15, интерлейкин 15 человека, рекомбинантный белок
Объем: 0 мкг
Наличие: Есть в наличии
Цена: 0 р.

Доступные варианты

* Фасовка:
Количество:  

Синонимы:   Interleukin 15, IL-15

Источник:    Клеточная линия CHO, продуцирующая rhIL-15.

Чистота:   >98% в соответствии с электрофорезом в ПААГ с последующим окрашиванием Coomassie Brilliant Blue.

Уровень эндотоксина:   <0.1 EU на 1 мкг белка, LAL-тест.

Предсказанный молекулярный вес:  15 кДа в редуцирующих условиях в ПААГ.

Биологическая активность: Рекомбинантный белок, rhIL-15 человека, стимулирует пролиферацию клеток линии CTLL-2, мышиных цитотоксических Т-лимфоцитов.  ED50: 2,5-3,8 нг/мл. Оптимальная концентрация для индивидуального применения определятся пользователем.

Форма

Лиофильно высушен из фосфатного буферного раствора (PBS), содержащего 0,05% Tween20, pH 7.0, профильтрованного через фильтр с диаметром пор 0,22мкм.
Содержит вспомогательный белок.

Разведение

Центрифугировать флакон при 1000rpm, 3 мин. Добавить стерильный фосфатный буферный раствор (PBS) до конечной концентрации 0,1-1 мкг/мкл. Оставить на 20-30 мин при комнатной температуре, затем центрифугировать при 1000rpm в течение 1 мин, и мягко ресуспендировать. Для приготовления рабочих растворов можно использовать буфер на водной основе или культуральную среду.

Добавление вспомогательных белков (BSA или FBS) не является необходимым.

Условия транспортировки

Перевозить при температуре окружающей среды.

Стабильность и Условия хранения

  • 12 месяцев, хранение невскрытой упаковки, при температуре от -20 до -70°C.
  • 1 месяц, разведенный в стерильных условиях, при температуре от 2 до 8°C.
  • 6 месяцев, разведенный в стерильных условиях, при температуре от -20 до -70°C.

Не рекомендуются повторные циклы замораживания-оттаивания раствора рекомбинантного белка.

Описание
Дополнительное описание

Интерлейкин-15, ИЛ-15 (англ. Interleukin-15, IL-15)

IL-15 – цитокин с плейотропным действием, необходим для развития, выживания и активации NK-клеток. Участвует в индукции цитотоксических эффекторных клеток. Действуя как антагонист интерлейкина-2, IL-15 способствует поддержанию CD8+ T-клеток памяти, а также поддержанию и выживанию CD4+ и CD8+ T-лимфоцитов. Действует на ряд других клеток.

Гомология с IL-15 кролика Oryctolagus cuniculus составляет 83,9%; мыши Mus musculus – 72,8%; крысы – Rattus norvegicus 72,2% (по результатам поиска гомологов программой blastp в базе UniProt).

Кодируется геном IL15. Цитогенетическая локализация гена: 4q31.21; Геномные координаты: 4:141,636,582-141,733,986.

IL-15 синтезируется в виде двух изоформ предшественника, отличающихся длиной сигнального пептида. Последовательность зрелого белка состоит из 114 аминокислотных остатков. Пространственная структура IL-15 представляет собой связку из четырех α-спиралей «вверх-вверх-вниз-вниз» с двумя петлями. В молекуле присутствуют две дисульфидные связи, один остаток аспарагина гликозилирован.

 IL-15 продуцируется лимфоцитами лимфатических узлов, а также нейронами и глиальными клетками коры головного мозга, гемопоэтическими клетками костного мозга, клетками белой и красной пульпы селезёнки, железистыми клетками в различных отделах желудочно-кишечного тракта, клетками органов мужской (клетки семенных протоков, клетки Лейдига, железистые клетки эпидидимиса, предстательной железы и семенных пузырьков) и женской (железистые клетки фаллопиевых труб, эпителий матки) репродуктивной системы и клетками других типов. IL-15 продуцируется различными клеточными линиями: HDLM-2, Karpas-707, U-266/70 (лимфоидные), RH-30, HeLa и другими.

Клетками-мишенями IL-15 являются NK-клетки, T- и B-лимфоциты, нейтрофилы, тучные клетки, антиген-презентирующие клетки, а также некоторые неиммунные клетки.

Рецептор к IL-15 состоит из трёх субъединиц: IL-15Rα, Il-2/15Rβ (также являющийся компонентом рецептора к IL-2), γc (общий компонент рецепторов к интерлейкинам 2, 4, 7, 9, 15, 21). Субъединица IL-2/15Rβ ассоциирована с киназой JAK-1, субъединица γc – с киназой JAK3. Связывание IL-15 с рецептором запускает проведение сигнала через JAK/STAT-путь, что ведёт к активации транскрипции генов, участвующих в процессах пролиферации, и обеспечивает выживание T-клеток. Активируются также сигнальные пути Ras/Raf/MAPK-, STAT5- и mTOR, что обеспечивает выживание и пролиферацию NK-клеток. В тучных клетках IL-15 связывается с уникальным рецептором IL-15RX, что ведёт к запуску двух основных путей: JAK-2/STAT5-сигнальный путь опосредует рост клетки, TYK2/STAT6-сигналинг – рост клетки и активацию антиапоптотического белка BCL-xL. В B-лимфоцитах активируются пути IL-15/STAT5 и IL15/SHC/Res/Raf/ERK, проведение сигнала по которым способствует их пролиферации, а также путь IL15/SyK/PLC1, участвующий в ингибировании апоптоза. В нейтрофилах IL-15-индуцированные сигнальные пути приводят к ингибированию апоптоза, способствуют фагоцитозу и индукции воспаления (Patidar, Yadav, Dalai, 2016).

IL-15 действует как в растворённой форме, так и при транс-презентации, находясь в комплексе с IL-15Rα и действуя на цепи IL-2/15Rβ и γc на клетках-мишенях. IL-15 действует в растворённой форме, а также при cis- и trans-презентации. В последних двух случаях IL-15 в комплексе с IL-15Rα, экспрессированном на поверхности IL-15-производящей клетки, действует на субъединицы IL-2/15Rβ b γc на той же самой или другой клетке. Считается, что в физиологических условиях IL-15 действует в основном как клеточно-связанный цитокин (Jakobisiak, Golab, Lasek, 2011).

IL-15 – цитокин, способствующий выживанию NK-, T-, B-клеток. IL-15, продуцируемый дендритными клетками, обладает хемотаксической активностью в отношении T-лимфоцитов, что инициирует их взаимодействие с дендритными клетками. IL-15 способствует поддержанию популяций CD8+ T-клеток памяти, а также запускает их реактивацию, ингибирует клеточную гибель, индуцированную IL-2. Введение рекомбинантного IL-15 способствует выживанию большинства эффекторных T-клеток. IL-15 задействован в регуляции гуморального иммунного ответа: он индуцирует пролиферацию B-клеток в герминативных центрах и синтез ими иммуноглобулинов, участвует в хоминге B-лимфоцитов.

IL-15 действует на ряд других клеток, а именно, активирует дендритные клетки, стимулирует дифференцировку моноцитов в дендритные клетки и синтез поверхностных маркёров дендритными клетками, ингибирует апоптоз нейтрофилов и запускает их фагоцитарную активность, способствует росту тучных клеток, выживанию и пролиферации кератиноцитов (Patidar, Yadav, Dalai, 2016).

IL-15 и рецепторы к нему экспрессируются в разных областях головного мозга. IL-15 участвует в серотониновой передаче сигналов, контроле поведения и настроения. Мыши, нокаутированные по гену IL-15Rα, демонстрируют признаки депрессии и ослабленную память, но пониженную тревожность. Возможно, таким образом, IL-15 способствует поддержанию адекватного уровня страха и активности. Мыши, лишённые других компонентов рецептора к IL-15 характеризуются рядом неврологических нарушений. Действуя в гипоталамусе, IL-15 участвует в контроле метаболизма, циркадных ритмов, температуры тела. Действуя в гиппокампе, он способствует формированию памяти. IL-15 вовлечён в нейрогенез (Pan et al., 2013).

Повышенная экспрессия IL-15 ассоциирована с аутоиммунными заболеваниями, болезнью Альцгеймера, диабетом I типа, лейкозом из больших гранулярных лимфоцитов, он вовлечён в патогенез острого миелоидного лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, хронического лимфоцитарного лейкоза. Анти-IL-15-терапия может быть использована для предотвращения отторжения имплантов (Patidar, Yadav, Dalai, 2016).

IL-15 рассматривается, как лекарственное средство, при лечении ВИЧ-инфекции, туберкулёза и малярии, поскольку он поддерживает T-клеточное звено иммунитета и NK-клетки, а также способствует гуморальному ответу. IL-15 может быть применён как адъювант при вакцинации против ряда патогенов, включая вирус гриппа, Toxoplasma gondii и другие (Patidar, Yadav, Dalai, 2016). IL-15 – перспективное средство при лечении злокачественных новообразований, благодаря комплексному действию на клетки, участвующие в реализации противоопухолевого иммунного ответа. Повышение эффективности IL-15 как противоопухолевого препарата может быть достигнуто за счёт увеличения времени полужизни в организме, минимизации побочных эффектов, применения IL-15 в комплексе с другими средствами (Jakobisiak, Golab, Lasek, 2011; Van den Bergh, Van Tendeloo, Smits, 2015; Robinson, Schluns, 2017).

Перспективной областью применения IL-15 является разработка и получение биомедицинских клеточных продуктов на основе генетически модифицированных лимфоцитов, несущих химерный рецептор к опухолевым антигенам (CAR-T cells). В таком случае IL-15 (вместе с IL-2 и IL-7) используется для экспансии культур трансдуцированных вирусными векторами Т-лимфоцитов и, иногда, NK-клеток.

Список литературы

Arenas-Ramirez N., Woytschak J., Boyman O. // Trends in Immunology (2015), 36(12): 763

Doersch K.M., DelloStritto D.J., Newell-Rogers M.K. // Exp Bio Med (2017), 242(4): 384

Collins R.A. et al. // Vet Immunol Immunopathol (1994), 40(4): 313

Levashov P.A. et al. // Biochemistry (2012), 77(11): 1312

Liao W., Lin J.-X., Leonard W.J. // Curr Opin Immunol (2011), 23(5): 598

Liao W., Lin J.-X., Leonard W.J. // J Immuni (2013), 38(1): 13

McKay D.B. // Science (1992), 257(5068): 412 (http://www.rcsb.org/structure/3INK)

Pan et al., 2013

Patidar, Yadav, Dalai, 2016

Tang A., Harding F. // Cytokine: X (2019), 1(1): 10001

Reih A., Szepietowski J.C. // Mediators of Inflammation (2007): ID64727

Ross S.H., Cantrell D.A. // Annu Rev Immunol (2018), 36: 411

https://www.uniprot.org/uniprot/P60568

https://omim.org/entry/147680?search=Interleukin%202&highlight=%22interleukin%202%22%202%20interleukin#mapping (режим доступа: https://tinyurl.com/s72bq22)

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/3558