rhDNase I, ДНКаза I человека, рекомбинантный белок

Источник:   Клеточная линия CHO, продуцирующая rhDNase I.

Уровень эндотоксина:   <0.1 EU на 1 мкг белка, LAL-тест.

Биологическая активность:  Одна единица Human recombinant DNase I (#SSF001) – количество фермента, необходимое для фрагментации 1мкг ДНК за 10мин при 37°С в 50мкл буфера, содержащего 40mM Tris-HCl (pH 7,9 при 25°С), 10mM NaCl, 6mM MgCl2, 10mM CaCl2.

Применение:   ДНКаза I является гликозилированным полипептидом, способным фрагментировать одно- и двухцепочечную ДНК. ДНКаза I обычно добавляется на этапах децеллюризации или при получении моноклеточной суспензии из образца ткани, как для последующего культивирования, так и для анализа на проточном цитометре, для снижения/избавления от клеточных конгломератов. Использование Human recombinant DNase I (#SSF001) является рутинным методом, применяемым для деградации ДНК. Рекомендуемая рабочая концентрация 400единиц/мл. Оптимальная концентрация для индивидуального применения определятся пользователем.

Активность фермента проявляется в присутствии : Ca2+и Mg2+ или Mn2+

Ингибиторы реакции: EGTA, EDTA

rhDNase I рекомбинантный белок был использован в следующих работах

Mesenchymal Stromal Cell-Produced Components of Extracellular Matrix Potentiate Multipotent Stem Cell Response to Differentiation Stimuli

Ekaterina Novoseletskaya, Olga Grigorieva, Peter Nimiritsky, Nataliya Basalova, Roman Eremichev, Irina Milovskaya, Konstantin Kulebyakin, Maria Kulebyakina, Sergei Rodionov, Nikolai Omelyanenko and Anastasia Efimenko.

Front. Cell Dev. Biol., 22 September 2020 | https://doi.org/10.3389/fcell.2020.555378

Форма

Лиофильно высушен из фосфатного буферного раствора PBS.
Не содержит вспомогательных белков.

Разведение

Центрифугировать флакон при 1000g, 3 мин. Добавить стерильный фосфатный буферный раствор (PBS) до конечной концентрации 0,1-1 мкг/мкл. Оставить на 20-30 мин при комнатной температуре, затем центрифугировать при 1000g в течение 1 мин, и мягко ресуспендировать. Для приготовления рабочих растворов можно использовать буфер на водной основе или культуральную среду. Добавление вспомогательных белков (BSA или FBS) не является необходимым.

Условия транспортировки

Перевозить при комнатной температуре.

Стабильность и Условия хранения:

• 24 месяца, хранение невскрытой упаковки, при температуре от -20 до -70°C.
• 1 месяц, разведенный в стерильных условиях, при температуре от 2 до 8°C.
• 6 месяцев, разведенный в стерильных условиях, при температуре от -20 до -70°C.

Не рекомендуются повторные циклы замораживания-оттаивания раствора рекомбинантного белка.